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Agarose瓊脂糖(創(chuàng)新片劑)使用說明書

發(fā)布時(shí)間:2017/11/17      點(diǎn)擊次數(shù):2474

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Agarose瓊脂糖(創(chuàng)新片劑)

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Agarose瓊脂糖(創(chuàng)新片劑)

D1005L1210

0.5g*200

室溫

350

 

瓊脂糖是線性的多聚物,基本結(jié)構(gòu)是1,3連結(jié)的β-D-半乳糖和1,4連結(jié)的3,6-內(nèi)醚-L-半乳糖交替連接起來的長(zhǎng)鏈  。瓊脂糖在水中一般加熱到90℃以上溶解,溫度下降到35-40℃時(shí)形成良好的半固體狀的凝膠,這是它具有多種用途的主要特征和基礎(chǔ)。瓊脂糖凝膠性能通常用凝膠強(qiáng)度表示。強(qiáng)度越高,凝膠性能越好。作為一種凝膠試劑,常用于通過凝膠電泳或者印跡法(如Northern或Southern)來進(jìn)行日常核酸分析,也適用于蛋白應(yīng)用,如輻射狀免疫擴(kuò)散(RID)實(shí)驗(yàn)。

在瓊脂糖凝膠電泳過程中,要根據(jù)要電泳分離的核酸的分子量大小選擇合適的瓊脂糖濃度,分子量大的核酸電泳時(shí)使用濃度較小的凝膠,分子量小的核酸電泳時(shí)使用濃度較大的凝膠。核酸在濃度越大的凝膠中電泳速度越小。如果膠濃度偏高,可能跑不動(dòng),如果膠濃度偏低,可能跑得太快,分不開。下面是瓊脂糖凝膠濃度與線性DNA分離范圍的參考數(shù)據(jù):

凝膠濃度(%)

線性DNA長(zhǎng)度(bp)

0.5

1000~30000

0.7

800~12000

1.0

500~10000

1.2

400~7000

1.5

200~3000

2.0

50~2000

選用瓊脂糖主要考慮的幾個(gè)參數(shù)包括:

1)   凝膠強(qiáng)度(gel strength)——施加于凝膠使之?dāng)嗔训耐饬Γ鄬?duì)來講,凝膠強(qiáng)度越大,性能越好。

2)   電滲(EEO)——液體穿透凝膠的一種電動(dòng)運(yùn)動(dòng)。瓊脂糖凝膠內(nèi)的陰離子吸附在基質(zhì)上不會(huì)發(fā)生遷移,但是解離的陽(yáng)離子就會(huì)朝負(fù)極遷移,從而產(chǎn)生電滲。由于生物聚合物的電泳遷移通常是朝負(fù)極運(yùn)動(dòng),則EEO產(chǎn)生的內(nèi)部對(duì)流會(huì)干擾分離效率,電滲越小,對(duì)電泳的不良影響越少。

3)   膠凝點(diǎn)(Gel point)——水溶性瓊脂糖溶液冷卻后形成凝膠時(shí)的溫度。液體向凝膠轉(zhuǎn)化的過程中,瓊脂糖溶液具有滯后性,因此,膠凝點(diǎn)不等同于膠熔點(diǎn)。

4)   硫酸鹽含量(sulfate content)——純度指標(biāo),因?yàn)榱蛩岣谴嬖诃傊莾?nèi)的主要離子基團(tuán);

產(chǎn)品性質(zhì)

凝膠強(qiáng)度(Gel Strength, 1.0%)

≥1200 (g/cm2)

膠凝溫度域(Geling Range(1.5%)

36-39

熔膠溫度域(Melting Range)

87-89

電滲值(EEO, -mr)

≤0.15

硫酸鹽(Sulfate, %)

≤0.15

DNA酶(DNase)

None Detected

RNA酶(RNase)

None Detected

蛋白酶(Protease)

None Detected

運(yùn)輸與保存方法

室溫運(yùn)輸和保存即可。

注意事項(xiàng)

1)   可用煮沸或微波加熱的方法來熔膠,瓊脂糖熔化必須*。熔膠可能會(huì)引起暴沸,需注意防止?fàn)C傷。

2)   為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

 

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